Эмбрион 4

Эмбрион 4 бб. Классификация эмбрионов при проведении процедуры эко

Культивирование

Начало культивирования зародышей происходит на следующий день после забора фолликулов. Врачом-эмбриологом производится оценка качества эмбрионов при ЭКО. Затем соединяются женские и мужские половые клетки, через некоторое время врач рассматривает под микроскопом скорость деления биоматериала.

Дата переноса бластоцист назначается в зависимости от количества биоматериала. Классификация эмбрионов по качеству при ЭКО определяется сутками.

Культивирование эмбрионов – это один из этапов ЭКО, поддерживающий жизнедеятельность зародыша перед их подсадкой в матку.

Зигота помещается в жидкость, схожую по температурному режиму и составу в маточных трубах. Создается подобная жидкость в лабораторных условиях. Чтобы клетки не погибли раньше времени, они постоянно находятся под присмотром медицинского персонала.

Какого качества бывают эмбрионы:

  1. 2 сутки – при этом контуры бластомеров четкие, форма – правильная, высокая способность имплантации;
  2. 3 сутки – бластомеры и цитоплазмы неровные, нормальная способность имплантации;
  3. 4 сутки – удовлетворительная способность имплантации;
  4. более 4 суток – неудовлетворительная способность имплантации.

Чтобы выбрать самые жизнеспособные зародыши, стараются использовать как можно больше яйцеклеток.

Качество

5 клеточный эмбрион считается нормой и достаточно часто применяется в медицинской практике. Для того, чтобы процедура ЭКО прошла успешно, обязательно проводится культивирование гамет. Качество эмбрионов для переноса при ЭКО зависит от многих факторов.

От чего зависит качество эмбрионов при ЭКО:

  1. экология;
  2. вредные привычки;
  3. наличия заболевания половых органов;
  4. иммунная система;
  5. лишний вес;
  6. несбалансированное питание;
  7. стрессовые ситуации;
  8. гормональные сбои.

Классы эмбрионов в ЭКО говорят о качестве биоматериала, от которого зависит исход процедуры.

Качество эмбрионов и их классы тесно связаны друг с другом. Существует 4 класса:

  • класс А – полностью отсутствую безъядерные фрагменты;
  • класс В–не более 20% безъядерных фрагментов от общего объема;
  • класс С – содержание ануклеарных фрагментов от 21% до 50%;
  • класс D – содержится более 50% безъядерных фрагментов, категория не используется для дальнейшего проведения процедуры.

Фрагментация эмбриона при ЭКО чаще всего говорит о каких-либо генетических нарушениях со стороны женских или мужских репродуктивных органах.

Классы

На сегодняшний день оценка качества зародышей происходит по количеству клеток, а также степени фрагментации.Если в карте ставится: эмбрионы 8а — это значит, что зигота содержит 8 клеток, а фрагментация полностью отсутствует. Также учитывается равномерность дробления, наличие вакуолей и отсутствие ядерных бластомеров.

Эмбрион bl1 – это маленькая бластоциста, качество которой на данном этапе оценить очень трудно. Имплантация дает положительные результаты в том случае, если хорошо развита внутренняя клеточная масса бластоцисты и трофобласт.

Эмбрион 4аа класса – это хорошее качество бластоцисты, имплантируется с вероятностью более 70%. Первая проверка качества зародыша происходит через 48 часов после изъятия яйцеклетки для проведения ЭКО. Оплодотворение яйцеклеток и качество зиготы оцениваются в первый день после подсадки.

Таблица — Качество эмбрионов для переноса

Зародыши выбирают по следующим критериям:

  1. степень фрагментации;
  2. качество;
  3. однородность и форма клетки;
  4. время деление клетки;
  5. отсутствие цитоплазмы.

Для проведения ЭКО оставляют только самые сильные зародыши для проведения.

Протокол культивирования

Протокол культивирования эмбрионов по дням проводится для того, чтобы выбрать более сильные зародыши.

Развитие зародышей происходит следующим образом:

  • 1 день – проводится пункция;
  • 2 день – клетки начинают делиться, при нормальном развитии должно быть от 2 до 4 бластомер;
  • 3 день – здоровые клетки продолжают делиться, бластомеров уже от 6 до 8;
  • 4 день – клетки разделяются на 10-16 бластомеров;
  • 5-6 день – бластомеры превращаются в бластоцисты, что увеличивает шансы имплантации.

Самые лучшие среды для культивирования эмбрионов считается та, которая близка к среде жидкости, находящейся в маточных трубах. В каждом отдельном случае проводится индивидуальное культивирование эмбриона в естественном цикле, так как у каждой женщины сроки овуляционного цикла свои.

Расшифровка протокола производится исключительно врачом-эмбриологом на основании формы, цвета, размера бластоцисты. Лаборант ежедневно проводит исследование каждого зародыша и вносит отметку в карту. Такой подход помогает выбрать самый подходящий образец для подсадки в маточные трубы будущей матери.

Противопоказания

ЭКО не имеет противопоказаний, однако, при внутриматочном введении эмбриона существуют некоторые факторы, при которых данную процедуру проводить не рекомендуется.

К противопоказаниям относятся:

  • опухоли различной этиологии;
  • фиброма;
  • нарушения функций репродуктивных органов;
  • отсутствие матки;
  • инфекционные заболевания;
  • воспалительные процессы;
  • обострения хронических заболеваний.

Если ЭКО несколько раз подряд не дает положительных результатов, это значит, что есть проблемы с яйцеклетками или сперматозоидами. В таком случае врачи советуют выбрать другой получения биоматериала, например, ИКСИ. Процедура подразумевает введение сперматозоида в цитоплазму ооцита.

Какой бы метод оплодотворения не использовался, часть материала останется непригодной. Одни зародыши быстро погибают, прекращая свой рост, другие имеют неподходящий генотип. По статистике в лучшем случае пригодны лишь 68% образцов. Культивирование помогает увеличить шанс прикрепления зародыша к матке. При хорошей подготовке приживается до 95% бластоцист.

На сегодняшний день оценка качества эмбрионов происходит в основном по морфологии — внешнему облику эмбриона. Морфологических параметров и характеристик эмбриона очень много, однако, основное значение для эмбрионов 2-3 дня развития имеет количество клеток (оно должно соответствовать дню развития), степень фрагментации (объем занимаемый безъядерными кусочками цитоплазмы эмбриона), равномерность дробления (бластомеры — клетки эмбриона на стадии дробления — должны иметь регулярную форму и равные размеры), наличие/отсутствие вакуолей и других включений в цитоплазму, отсутствие мультиядерных бластомеров (ядро клетки поделилось, а цитоплазма отстает).

Вот нормы по количеству клеток (бластомеров) в первые дни развития (день пункции — нулевой) :
2 сутки — 2-6 клеток
3 сутки — 4-10 клеток
4 сутки — более 8 клеток

Наиболее часто встречается цифро-буквенная классификация по качеству эмбрионов 2-3 дня. Она отражает главным образом степень фрагментации и количество клеток в эмбрионе. Записывается это обычно так: 8А, 4В, 2С и т.п., где цифра означает количество клеток в эмбрионе, а буква — процент фрагментации.

А — фрагментация отсутствует
В — фрагментация менее 25%
С — фрагментация 25-50%
D — тотальная фрагментация, более 50%. Такие эмбрионы не переносят в полость матки и не криоконсервируют.

Классификация бластоцист:

Существует несколько классификаций бластоцист, но все они похожи. (обращаем Ваше внимание на статью: «Перенос бластоцисты» ) Качество бластоцисты определяется тремя основными параметрами — размером (объемом полости бластоцисты), качеством внутренней клеточной массы (клетки, дающие начало всем тканям будущего зародыша) и качеством трофэктодермы (клеток, дающим в последствии начало всем внезародышевым оболочкам — хориону, плаценте. Также отмечается наличие/отсутствие естественного хэтчинга — точечного разрыва оболочки эмбриона и выклева бластоцисты из нее.

Цифрами обозначается размер бластоцисты — стадия ее экспансии.

1 — ранняя, полость около половины объема бластоцисты;

2 — средняя, полость более половины объема, но размер бластоцисты не сильно больше размера дробящегося эмбриона;

3 — экспандированная бластоциста — полость занимает большую часть объема бластоцисты, блестящая оболочка истончена, объем бластоцисты в 2 и более раза превышает объем дробящегося эмбриона;

4 — бластоциста, вступившая в естественный хэтчинг (выклев);

5 — бластоциста в хэтчинге после проведения ПГД;

6 — полностью вылупившаяся бластоциста.

Первая буква обозначает качество внутренней клеточной массы — массы клеток, из которой в будущем будет развиваться сам эмбрион.

А — плотно упакованная, достаточная по размеру ВКМ, хорошо различима, отсутствуют включения, вакуоли, тяжи и пр.;

B — ВКМ хорошо различима, но имеет незначительные дефекты (небольшой объем, неплотно упакована, мало клеток, есть включения и т.п.);

С — ВКМ либо неразличима, либо имеет серьезные нарушения в структуре;

D — дегенеративная ВКМ.

Второй буквой аббревиатуры обозначается качество трофобласта — клеточного слоя полностью окружающего бластоцисту. Впоследствии из него разовьются все внезародышевые оболочки эмбриона, он отвечает за внедрение эмбриона в стенку матки — имплантацию.

А — трофобласт хорошо организован, многоклеточный и однослойный;

В — трофобласт состоит из нескольких слоев клеток, клетки распределены неравномерно либо клеток меньше, чем в норме;

С — трофобласт состоит из небольшого числа клеток, либо имеет включения, вакуоли, тяжи и иные отклонения от нормы;

D — дегенеративный трофобласт.

Как известно ЭКО достаточно сложная и дорогостоящая процедура, которая занимает много времени и средств, но при этом, увы, не гарантирует положительный результат.

Причины неудач могут быть разными и физиологическими, и психологическими. И если с первыми Вам поможет разобраться Ваш врач, то психологические проблемы, как правило, остаются без внимания в процессе подготовки к ЭКО. Однако их влияние на результат очень велико!

Как узнать: не является ли Ваше бесплодие следствием психологических проблем?

Как исключить влияние негативных психологических факторов в процессе ЭКО?

Как увеличить Ваш шанс в ЭКО с психологической помощью?

Ответить на эти вопросы Вам поможет он-лайн диагностика психосоматических причин бесплодия у женщин.
По результатам тестирования: выявление психологических барьеров для наступления беременности; рекомендации практикующих психологов.

Оценка качества эмбрионов на сегодняшний день происходит в основном по морфологии — внешнему облику эмбриона. Морфологических параметров и характеристик эмбриона очень много, однако основное значение для эмбрионов 2-3 дня развития имеет количество клеток (оно должно соответствовать дню развития), степень фрагментации (объем, занимаемый безъядерными кусочками цитоплазмы эмбриона), равномерность дробления (бластомеры — клетки эмбриона на стадии дробления — должны иметь регулярную форму и равные размеры), наличие/отсутствие вакуолей и других включений в цитоплазму, отсутствие мультиядерных бластомеров (ядро клетки поделилось, а цитоплазма отстает).

Вот нормы по количеству клеток (бластомеров) в первые дни развития (день пункции — нулевой):2 сутки — 2-6 клеток3 сутки — 4-10 клеток4 сутки — более 8 клеток

Наиболее часто встречается цифро-буквенная классификация по качеству эмбрионов 2-3 дня. Она отражает главным образом степень фрагментации и количество клеток в эмбрионе. Записывается это обычно так: 8А, 4В, 2С и т.п., где цифра означает количество клеток в эмбрионе, а буква — процент фрагментации.А — фрагментация отсутствуетВ — фрагментация менее 25%С — фрагментация 25-50%D — тотальная фрагментация, более 50%. Такие эмбрионы не переносят в полость матки и не криоконсервируют.Записывается это обычно так: 8А, 4В, 2С и т.п.

Классификация бластоцист.
Существует несколько классификаций бластоцист, но все они похожи. Качество бластоцисты определяется тремя основными параметрами — размером (объемом полости бластоцисты), качеством внутренней клеточной массы (клтеки, дающие начало всем тканям будущего зародыша) и качеством трофэктодермы (клеток, дающим в последствии начало всем внезародышевым оболочкам — хориону, плаценте. Также отмечается наличие/отсутствие естественного хэтчинга — точечного разрыва оболочки эмбриона и выклева бластоцисты из нее.Цифрами обозначается размер бластоцисты — стадия ее экспансии.1 — ранняя, полость около половины объема бластоцисты;2 — средняя, полость более половины объема, но размер бластоцисты не сильно больше размера дробящегося эмбриона;3 — экспандированная бластоциста — полость занимает большую часть объема бластоцисты, блестящая оболочка истончена, объем бластоцисты в 2 и более раза превышает объем дробящегося эмбриона;4 — бластоциста, вступившая в естественный хэтчинг (выклев);5 — бластоциста в хэтчинге после проведения ПГД;6 — полностью вылупившаяся бластоциста.Первая буква обозначает качество внутренней клеточной массы — массы клеток, из которой в будущем будет развиваться сам эмбрион.А — плотно упакованная, достаточная по размеру ВКМ, хорошо различима, отсутствуют включения, вакуоли, тяжи и пр.;B — ВКМ хорошо различима, но имеет незначительные дефекты (небольшой объем, неплотно упакована, мало клеток, есть включения и т.п.); С — ВКМ либо неразличима, либо имеет серьезные нарушения в структуре;D — дегенеративная ВКМ.Второй буквой аббревиатуры обозначается качество трофобласта — клеточного слоя, полностью окружающего бластоцисту. Впоследствии из него разовьются все внезародышевые оболочки эмбриона, он отвечает за внедрение эмбриона в стенку матки — имплантацию.А — трофобласт хорошо организован, многоклеточный и однослойный; В — трофобласт состоит из нескольких слоев клеток, клетки распределены неравномерно либо клеток меньше, чем в норме; С — трофобласт состоит из небольшого числа клеток, либо имеет включения, вакуоли, тяжи и иные отклонения от нормы;D — дегенеративный трофобласт.Примером может служит Bl1 (у ранних бластоцист еще трудно оценить разные популяции клеток), Bl2AB, Bl3BB, Bl4AC и т.п.

Описание: День 0. Непосредственно после пункции оценивают зрелость полученных ооцит-кумулюсных комплексов (ОКК). ОКК с прозрачным кумулюсом как правило содержит зрелый ооцит и получает оценку «1-1».При пункции возможно получение зрелых, незрелых, а также дегенеративных и разрушенных яйцеклеток. Точная оценка состояния ооцита возможна только после его очистки перед проведением ИКСИ.

В зрелых, готовых к оплодотворению ооцитах определяется первое полярное тельце. В эмбриологическом протоколе зрелый ооцит обозначают MII.

Если процесс созревания ооцита в фолликуле нарушен или неправильно введен триггер (ХГ), то существует большая вероятность получения незрелых клеток, обозначаемых – MI и GV (Рис.1). Возможна и полная дегенерация ооцита (Deg).

Рис 1. Ооциты, полученные при пункции яичников после удаления кумулюса (денюдации). А — MII, Б – MI, В – GV. Pb – полярное тельце, ZP – блестящая оболочка

Через 18-20 часов после добавления сперматозоидов или ИКСИ (1-е сутки) при нормальном оплодотворении образуются два пронуклеуса. Это предшественники ядер будущих клеток-бластомеров, на которые начинает делиться оплодотворенная яйцеклетка. При правильном оплодотворении оба пронуклеуса четко различимы. В этом случае им присваивают оценку 2pN. Если пронуклеусов не видно, что обычно связано с отсутствием оплодотворения, в протокол записывается 0pN. При неправильном оплодотворении возможно появление нескольких пронуклеусов, что отражается в записи, например 3pN, 6pN и т.д.(Рис2). «Неправильно» оплодотворенные ооциты не пригодны для дальнейшей работы и утилизируются.

Рис 2. Первый день развития in vitro – формирование зиготы и образование пронуклеусов. А – 2pN (нормальное оплодотворение) – два пронуклеуса Б – 3pN (аномальное оплодотворение) – больше, чем два пронуклеуса.

Дальнейшее развитие эмбриона, дробление, происходит в течение пяти-шести дней. Оценка качества эмбрионов проводится через 40-42 часа (2 сутки), 72-74 часа (3 сутки) и 120 часов (5 сутки) после оплодотворения. Дробление эмбриона должно быть симметричным (получаются бластомеры одинакового размера) и равномерным (все бластомеры претерпевают деление). Для наглядности эмбриологи используют численно – буквенную систему оценки качества, где цифра означает количество бластомеров, а буква их качество. Для обозначения эмбриона хорошего качества используется буквенный индекс «А», среднего «B», низкого «С». Возможны и промежуточные варианты, например АВ, ВА, ВС, СВ, когда сложно дать однозначную оценку (Рис3).

2-й день (4А) 3-й день (8А) 4-й день (comp)

Рис 3. Дробление эмбриона в течение первых трех суток in vitro и компактная морула на 4-й день развития. Представлены эмбрионы отличного (А) качества. B – бластомер ZP – блестящая оболочка.

Для второго дня культивирования перспективными считаются эмбрионы с четырьмя бластомерами — 4А, 4АВ, 4В. Для третьего — восьмиклеточные (8А, 8АВ, 8В). Эмбрионы плохого качества (ВС, СВ, С) как правило не переносят, оставляют до пятого дня и при формировании нормальной бластоцисты замораживают или переносят в матку. В случае неравномерного дробления (наличия бластомеров разной величины) потенциал эмбриона к имплантации снижен, и обозначается это приставкой «un», например 3Вun. Наличие фрагментов цитоплазмы обозначают «fr», например 8ВСfr (Рис.4). Оценивается и наличие вакуолей. При их визуализации ставится отметка «vac». В норме каждый бластомер несет одно ядро, если хотя бы в одном бластомере визуализируется больше одного ядра, это называется мультинуклеацией (mN) и указывает на значительную вероятность хромосомной патологии данного эмбриона.

Рис 4. Дробление эмбриона в течение первых трех суток in vitro. Представлены эмбрионы хорошего (ВА, В) и удовлетворительного (ВС) качества. Во втором ряду эмбрионы с неравномерным дроблением (3Bun и 4BAun).

К концу третьих и на четвертые сутки культивирования эмбрион начинает компактизацию (границы его клеток становятся неразличимы) и готовится к образованию бластоцисты. Его клетки могут быть частично (p.comp) или полностью компактизованы (comp) (Рис.5). Обычно оценка эмбрионов на четвертые сутки не проводится ввиду малой информативности данной стадии развития. Однако наличие компактизации на вторые сутки может свидетельствовать об аномальном развитии и обязательно должна отражаться в эмбриологическом протоколе.

Рис 5. Стадия компактизации 4-е сутки культивирования A – p.comp Б — comp

На пятые сутки, примерно через 120 часов после оплодотворения эмбрион образует бластоцисту (Bl) (Рис.6). Оценка качества бластоцист подразумевает ее размер, который отражается цифрами от 1 до 5; состояние внутренней клеточной массы (ВКМ) (от «A» до «С») и окружающих ее клеток – трофобласта (от «а» до «с»). Лучшими для переноса будут бластоцисты размера от 3 до 5, имеющие многоклеточную ВКМ и трофобласт – Bl4Aa, Bl4Ab. Бластоцисты среднего качества обозначаются как – Bl2Bb, Bl3Bb, а плохого – BlCc.

Рис 6. Бластоцисты на пятый день развития in vitro. e.bl – ранняя бластоциста, Bl3Ab – экспандированная бластоциста, Bl5Ab – бластоциста перед хетчингом, ВКМ – внутренняя клеточная масса.

Дальнейшее развитие эмбриона происходит уже в матке после имплантации. Для успешной имплантации бластоцисте необходимо выйти из окружающей ее блестящей оболочки. Данный процесс называется вылупление, или хетчинг. В случае, когда эмбриолог отмечает изменения блестящей оболочки и после криоконсервации эмбрионов процесс самостоятельного вылупления бластоцисты может быть затруднен и его возможно облегчить применяя вспомогательный хетчинг. В нашем центре мы используем наиболее эффективный лазерный вспомогательный хетчинг.

Самая высокая частота оплодотворения получена при переносе эмбрионов на стадии бластоцисты. Так, в нашем центре она составляет 53%. В то время, как при переносе на стадии 6-8 бластомеров – 47%.

Замораживание и ПГД также лучше всего выполнять на стадии бластоцисты. Однако, не все эмбрионы доходят до бластоцисты. Поэтому общепринятым считается следующий подход: если на 5 день культивирования имеется меньше 5 эмбрионов, как минимум один переносят, остальные оставляют до 5 дня. Из достигших бластоцисты еще один может быть перенесен (двойной перенос), остальные замораживают. Если на 3 день эмбрионов 5 и больше, их не переносят и оставляют культивировать до 5 дня. На 5 день одну, реже две бластоцисты переносят, остальные замораживают.

В заключение следует отметить, что описываемые морфологические критерии оценки качества эмбрионов являются основными, необходимыми, но не всегда достаточными для выбора эмбриона для переноса. Так, нередко после переноса эмбрионов высшего качества имплантация не наступает и, наоборот, бывают случаи наступления и успешного развития беременности при переносе эмбрионов плохого качества. Поэтому существуют дополнительные способы прогноза имплантации эмбриона (time-laps, ПГС, анализ метаболитов и др.), которые дополняют морфологические критерии и обеспечивают в совокупности выбор лучшего эмбриона.

Бластоциста в процессе хетчинга (выхода из блестящей оболочки для имплантации)

А – световая микроскопия HMC контраст Б – Сканирующая электронная микроскопия — ZP – блестящая оболочка TE – трофэктодерма ВКМ – внутренняя клеточная масса

В последние годы все большую популярность набирает такой метод рождения ребенка, как искусственное оплодотворение. Положительный результат такой процедуры определяется различными факторами и соблюдением правильно подобранных методик на различных этапах цикла. Существует определенная классификация эмбрионов при ЭКО, которые в последующем будут перенесены в матку женского организма.

Особенности искусственного оплодотворения

На сегодняшний день искусственное оплодотворение является одним из способов восстановления способности женского организма к рождению ребенка. Такая методика не такая сложная, как пересадка женской половой клетки, но в то же время позволяет добиться желаемого результата.

Каким же способом может проводиться искусственное оплодотворение?

Все виды искусственного оплодотворения представляют собой довольно сложные процедуры, и на конечный результат влияет сразу несколько факторов. Именно поэтому потенциальным родителям следует набраться терпения и верить в успех.

Распространенным методом наступления у женщины беременности считается ЭКО, когда оплодотворение полученной из организма яйцеклетки проводится в искусственных условиях. В течение нескольких суток контролируют развитие эмбриона в пробирке, после чего помещают его в детородный орган женского организма для дальнейшего роста.

Классификация эмбрионов

Обычно проводится визуальная оценка качества подготовленных для переноса зародышей, а также особенности их развития. В день проведения пункции выполняется оплодотворение ооцитов и после этого специалист каждый день под микроскопом контролирует рост эмбрионов и классифицирует их с учетом определенной схемы.

Оценка качества эмбрионов осуществляется с учетом различных критериев в зависимости от времени суток.

В первые сутки после оплодотворения проводится оценка эффективности процедуры, и после этого обращается внимание на первое клеточное деление зародившегося организма. На 2 и 3 сутки начинается процесс дробления клеток эмбриона и оценивается количество бластомеров. На вторые сутки после оплодотворения их количество должно составлять 4-5, а на 3 сутки развития увеличивается до 6-8. Кроме этого, специалист обращает внимание на формы и размеры эмбрионов, а также присутствие фрагментации.

Чаще всего встречается цифро-буквенная классификаций по качеству зародышей второго — третьего дня. Она позволяет оценить степень фрагментации и количество клеток в эмбрионе. Обычно записывается число с буквой, где первый показатель отражает количество клеток в эмбрионе, а второй — процент фрагментации.

  • А — говорит о том, что фрагментация полностью отсутствует:
  • В — показатель фрагментации составляет 25%;
  • С- уровень фрагментации увеличился до 25-50%;
  • D-показатель фрагментации более 50%

Обычно зародыши с буквой D не подлежат переносу в полость детородного органа женщины и не консервируются.

Классификация бластоциста

После того, как полость внутри морулы достигает 50% ее объема, зародыш получает название бластоциста. Нормальным считается формирование бластоцисты с конца 4 до средины 6 суток, и преимущественно это происходит на пятые сутки.

Составляющими бластоцисты считаются две популяции клеток:

  • трофобласт — это однослойный эпителий, который окружает полость;
  • внутриклеточная масса, то есть плотное соединение клеток.

Основным назначением трофобласта является успешное внедрение эмбриона в эндометриальную ткань детородного органа. В последующем клетки трофобласта дают старт развитию всем не зародышевым оболочкам плодного яйца. Все ткани и органы будущего плода начинают формироваться из внутренней клеточной массы.

Потенциал зародыша к имплантации повышается в ситуации, когда выявляется большая полость бластоцисты и хорошо развита внутренняя клеточная масса и трофобласт. Внедрение бластоцисты в эндометриальную ткань детородного органа обычно приходится на 6-7 сутки развития эмбриона.

Выделяют несколько классификаций бластоцист, которые схожи между собой. При определении качества бластоцисты делается акцент на следующие показатели:

  • качество трофэктодермы;
  • размер полости;
  • качество внутриклеточной массы.

Такой метод оценки зародышей по внешнему виду вполне себя оправдывает, поскольку имеется корреляция между частотой успешного зачатия и качеством переносимых эмбрионов. На самом деле, определение качественного зародыша считается довольно сложной задачей, от которого в последующем зависит конечный результат.

Перенос эмбриона в детородный орган

Обычно практикуется помещение эмбриона в матку на 2-3 день после проведения культивирования. Выбор момента определяется интенсивностью дробления эмбрионов. Медицинская практика показывает, что при процедуре ЭКО в полость детородного органа лучше всего переносить двух зародышей только высокого качества. В том случае, если их качество вызывает некоторые сомнения, то рекомендуется подсадка сразу трех эмбрионов.

Некоторые медицинские центры практикуют перенос в детородный орган сразу четырех и даже пяти эмбрионов. Однако, в последнее время многие специалисты утверждают, что оптимальным вариантом служит помещение в матку трех зародышей. После такой процедуры подсаженные эмбрионы приживаются либо погибают. При переносе в матку большего числа эмбрионов повышаются шансы на наступление многоплодной беременности.

Подсадка зародышей в полость детородного органа выполняется после тщательно взвешенных решений специалистом с учетом их качества и количества. Используя классификацию эмбрионов, медицинские клиники выявляют именно яйцеклетку, которая может наилучшим образом внедриться в маточную полость. Именно из нее в последующем происходит развитие здорового и полноценного эмбриона. После окончания процедуры имплантации начинается процесс активного роста эмбриона внутри материнского организма.

4ЭКО. 2 неразвивающиеся беременности.

Здравствуйте, Борис Александрович! Заранее простите за длинный текст, но история у меня долгая. Надеюсь, вы найдете время, чтобы прочитать и проконсультировать меня.
Мне 35 лет, рост 165, вес 50. Мужу тоже 35 лет. В течении 9 лет не могла забеременеть. До брака беременностей не было.
В подростковом возрасте заметила излишний рост волос на теле, в 18 лет обратилась к врачу по поводу этого и нерегулярных менструаций, в ходе обследования сообщили, что повышены мужские гормоны, поставили СПКЯ. Лечение в течение нескольких месяцев Диане 35, дексаметазон. Менструации отрегулировали, но цикл остался удлиненный 30-35 дней (до сих пор). Спустя несколько лет вышла замуж. При планировании беременности в 2008 г. проходила обследование, инфекций не обнаружено, гормоны в целом были в норме (т.к до этого принимала ОК), однако с помощью мониторинга УЗИ и тестов обнаружилось мультифолликулярные яичники и отсутствие овуляций в нескольких циклах подряд. ГСГ (2009, 2010)- трубы проходимы.
Мужа также обследовали в 2008 , выяснилось, что у него вообще АЗООСПЕРМИЯ. При обследовании причин не обнаружили. У мужа проверили Локусы (SRY, AZFa, AZFb, AZFc). Изменеий не обнаружено. Провели лечение , после которого наилучший анализ – олигоастенозооспермия 3 стадии. Отправили нас на ЭКО+ИКСИ.
Ездили на ЭКО+ИКСИ по квоте в Москву в НЦАГИП на Опарина, было 3 неудачных попытки:
1 протокол (2010)– получено 15 ооцитов, оплодотворились 8, до 5 дня доросли 2. Перенос отменен в связи с сильной гиперстимуляцией. Крио перенос через 3 месяца (2010). В поддержке дюфастон, дивигель, фолио. ХГЧ на 14 день – 0,4.
2 протокол (2011) – на более низких дозах стимуляции получено 8 ооцитов, оплодотворились 7, до 5 дня доросли 2. Поддержка – дюфастон, достинекс, фраксипарин, фолио. ХГЧ на 14 день – 0,27.
В 2012 обнаружен фиброзный полип на УЗИ, удален при гистероскопии.
3 протокол (2013) — получено 6 ооцитов, подсадка на 3 день 2 эмбрионов. В поддержке – дюфастон, дивигель, фолио, фраксипарин. ХГЧ на 14 день – 1,27.
Все три раза по словам репродуктолога эмбрионы были хорошего качества. Эндометрий во всех протоколах называли «красивым». Никакого мониторинга гормонов после подсадки не проводилось. Причин неудач доктор назвать не смогла. Предположила только, что из-за плохого качества спермы.
В 2014 году провели диагностическую лапароскопию и гистероскопию. Удалили 2 очага эндометриоза в брюшной полости, 2 кисты на левом яичнике, 2 миомы на матке (все маленьких размеров). На гистероскопии ничего не обнаружено. Пролечилась 3 месяца Визанной против эндометриоза.
Обследовали генетику: кариотипы меня и мужа : 46хх, 46ху норма. НLA-типирование – 1 совпадение Локус DQB1*0601. По результатам моего генетического исследования есть несколько полиморфизмов генов (если надо укажу каких), по которым выдали заключение: неклассическая форма ВДКН, риск микротромбозов, риск гестоза ФПН. Рекомендован прием дексаметазона (1\4 на ночь) 1 месяц, ангиовит постоянно, капилар, контроль фибриногена, антикоагулянты во время беременности.
4 протокол ЭКО+ИКСИ был в клинике в Польше летом 2014 года.
При обследовании был повышен гормон ДГЭАС, пролактин, ТТГ. Для нормализации прописали метипред (3 табл. в день), Эутирокс 25 мг., достинекс. Провели стимуляцию, получено 20 ооцитов, из них 11 хорошего качества, оплодотворились 8 яйцеклеток, получено 5 бластоцист. Перенесено на 5 день 2 эмбриона 2ВВ и на 6 день заморожены еще 3 бластоцисты (4АВ, 4ВС, 4СВ). В поддержке назначен утрожестан 200 (2х3 в день вагинально), эстрофем (1х3 в день вагинально), метипред (в связи с повышенным ДГЭА и эндометриозом, 3 таблетки в день!), достинекс (1\4 таб. раз в неделю), ангиовит, эутирокс 25. ХГЧ мониторили на 4 , 7, 11 дпп. На 12 день ХГЧ упал с 283 до 110. Т.е была биохимическая беременность. Причины предположили из-за повышенного ТТГ. К криопротоколу ТТГ нормализовали эутироксом 75 мг. Криоперенос был в ноябре 2014. Перенесен 1 эмбрион 4 АВ. Эндометрий хороший 13 мм. В поддержке: утрожестан 200 (2х3 вагинально), эстрофем (1х3 вагинально), метипред (3 табл. в день), эутирокс 75, ангиовит, достинекс (1\4 таб. раз в неделю), аспирин кардио 1 таб, клексан 0,4. ХГЧ рос, на 15 дпп 3900, на 18 дпп упал 2900, на 21 дпп снова вырос 5900 и далее продолжал расти медленно неравномерно. На 19 день УЗИ ПЯ 11 мм, на 25 дпп УЗИ ПЯ 14 мм, эмбрион в ПЯ отсутствовал. На 29, 34 дпп на УЗИ ПЯ выросло до 22 мм, но эмбрион так и не обнаружили. Поставили диагноз – неразвивающаяся беременность, анэмбриония. Сделали вакуумную чистку.
В марте 2015 сделала биопсию эндометрия, гистология показала железистую гипермплазию. 3 недели назад мне провели гистероскопию с выскабливанием. Гистология подвердила железистую гиперплазию, фиброзные полиповидные фрагменты. Предпложили, что возможно это также явилось причиной неразвивающейся беременности.
Сейчас готовлюсь к криопротоколу, пока еще свежий эндометрий.
В связи с чем задаюсь вопросом:
1. может ли метипред в такой дозе (3 таблетки в день ) повлиять на замирание беременности? Поляки дексаметазон не используют и дозировку метипреда 3 таблетки считают безвредной и обычной, назначают многим при андрогенах и эндометриозе, постепенно убирая совсем к 12 неделе. Хотя наши российские врачи приходят в ужас от этой дозы. И рекомендуют именно дексаметазон. Мне кажется, что с моими проблемами, метипред мне помог с имплантацией, но смущает именно доза.
2. Какая причина неразвивающейся беременности и анэмбрионии более вероятна в моем случае – слабые эмбрионы (плохое качество спермы), или проблемы с эндометрием, или гормоны? На что можно еще обратить внимание при криопротоколе?
3. Поскольку криоэмбрионы остались слабые (4 ВС, 4СВ), чем я могу им «помочь»? Слышала про методику подкалывания ХГЧ после подсадки. В клинике где я делаю, это не практикуют. Можете подсказать, действительно ли есть такая методика и может ли она помочь?

Оценка качества ооцитов и эмбрионов

Все пациенты интересуются качеством полученных клеток, а в дальнейшем и качеством эмбрионов. Однако данный вопрос многофакторный и не имеет однозначного ответа. Начнем с начала. Первый вопрос, который задают пациенты, когда к ним в палату после процедуры забора ооцитов приходит эмбриолог, звучит всегда одинаково: «А клетки у меня хорошие?». Хочется сразу заметить, что на этот вопрос очень сложно ответить на данном этапе программы ВРТ. Первичная оценка ооцита основана на непосредственном визуальном анализе морфологии ооцит-кумулюсного комплекса. При получении ооцитов эмбриолог смотрит на клетки через бинокулярный микроском с незначительным уровнем увеличения. Выглядит это вот так:

В данной ситуации оценить детально качество ооцитов не представляется возможным. Эмбриолог может только делать предположения. Поэтому оценка ооцитов на этапе проведения трансвагинальной пункции яичников не проводится.

После забора ооцитов эмбриолог определяется с тем, каким методом проводить оплодотворение полученных клеток.

Метод оплодотворения выбирается на основании показателей мужского материала. Если показатели спермограммы снижены – выбирается метод ICSI. Суть его заключается в том, что эмбриолог очищает ооциты от клеток кумулюса и с помощью специальных инструментов, работая на специальном микроскопе, вводит морофологически хороший, активно-подвижный сперматозоид внутрь клетки. Перед тем как ввести сперматозоид в клетку, его обездвиживают. Данный метод оплодотворения предлагается также парам с бесплодием неясного генеза и пациентам, планирующим проведение преимлантационной генетической диагностики. Помимого этого, ИКСИ может быть проведено по желанию пациента.

При хороших показателях спермограммы проводится оплодотворение методом ЭКО. В чашке со специальной средой соединяют сперматозоиды и ооциты, а оплодотворение происходит естественным способом.

Итак, поговорим более подробно о зрелости и качестве ооцита.

Созревание ооцита до состояния, когда он способен к оплодотворению, происходит в процессе стимуляции суперовуляции, проводимой врачом гинекологом-репродуктологом. Не все ооциты в процессе стимуляции достигают зрелости.

  • Способны оплодотворятся только ооциты, находящиеся в стадии метафазы 2 процесса мейоза. Их обозначают как М2.

Зрелый ооцит выглядит так

  • Ооциты не достигшие зрелости имеют отличия от ооцита М2, которые эмбриолог способен увидеть только при выполнении оплодотворения методом ICSI. Незрелые ооциты имеют 2 вида: это клетка находящаяся в метафазе 1 мейоза (М1) и так называемый герминальный везикул (GV) ооциты в профазе I деления мейоза, определяемые по наличию зародышевого пузырька или ядерной оболочки в цитоплазме.

М1

При оплодотворении методом ЭКО такую оценку не проводят. Возможность оценить клетки в данной ситуации возникает только утром следующего дня, а в это время не всегда возможно понять, какими клетки были в момент пункции, т.к. они имеют возможность пройти процесс дозревания в условиях инкубатора.

Что такое качество ооцита

Качество ооцита характеризует внешний вид цитоплазмы, вителлинового слоя, полярного тельца. Гомогенная цитоплазма с однородным цветом и отсутствием гранулярности характеризует хорошее качество ооцита. Вакуоли, темная окраска, всевозможные включения, деформация или гранулярность расцениваются при морфологической оценке качества ооцита как негативные признаки.

Ооцит плохого качества, с гранулированной цитоплазмой и вакуолью большого размера в центре.

Оценка оплодотворения

Оценка оплодотворения проводится утром следующего за пункцией дня. Этот день считается 1-м днем эмбрионального развития.

Возможность понять, произошло ли оплодотворение клетки, появляется через 18 часов после оплодотвоерния и характеризуется формированием пронуклеусов. Эмбрион первых суток развития называется зиготой.

На этот день эмбриолог оценивает «правильность» оплодотворения. Нормально оплодотворившийся ооцит содержит 2 пронуклеуса. Все остальные варианты считаются отклонением.

Триплоидный эмбрион (3pn)

Аномально оплодотворившиеся эмбрионы исключаются из культивирования.

Оценка качества эмбрионов 2-3 дня развития

Начиная со вторых суток эмбрионального развития начинается фаза дробления.

Дробление — это синхронное быстрое деление эмбриона на равные крупные клетки. Эти клетки называются бластомерами. Оценка качества эмбриона производится по равномерности бластомеров. Чем более равномерные бластомеры содержит эмбрион, тем лучшим считается его качество. Оценку эмбрионов данных суток развития осуществляют по количеству бластомеров (обозначается цифрой) и по дополнительным критериям, таким как равномерность бластомеров и наличие фрагментации (оценивается латинскими буквами a,b,c,d и их комбинацией).

Эмбрион хорошего качества выглядит так.

4-е сутки эмбрионального развития

На 4-е сутки развития эмбрион человека состоит уже, как правило, из 16-18 клеток, межклеточные контакты постепенно уплотняются, и поверхность эмбриона сглаживается. Этот процесс называется компактизацией. Важно понимать, что до 3-х суток дробление эмбриона происходит механически, каждая клетка делится пополам, черпая энергию из запасов ооцита. Начиная с 4 суток эмбрионального развития начинается дифференциация клеток эмбриона, часть из них сформируют зародыш, остальные будут обеспечивать возможность имплантации и формирования плаценты.

На данном этапе эмбрионы наиболее чувствительны к отрицательным воздействиям.

Качество бластоцисты, которая сформируется из морулы, оценить практически невозможно.

Оценка качества морулы проводится по характеристикам компактизации:

  • А — эмбрион полностью компактизован. Клеточные мембраны видны нечетко.

  • В — компактизовано более 75% бластомеров. Эмбрион сохраняет сферичную форму и гладкую поверхность.

  • С — частичная компактизация (около 50% бластомеров).

  • D — компактизация менее 50% бластомеров. Различимы фрагменты и некомпактизовавшиеся бластомеры.

Морулы отличного качества

Морула плохого качества

Далее внутри морулы начинает формироваться полость. Когда эта полость достигает достигает 20% от ее объема, эмбрион называется бластоцистой. В норме формирование бластоцисты допускается с конца 4-х по середину 6-х суток развития, но чаще это происходит на 5-е сутки. В редких случаях возможно формирование бластоцисты к 7-м суткам эмбрионального развития.

Бластоциста состоит из двух популяций клеток, таких как: трофэктодерма (однослойный эпителий, окружающий полость) и внутренняя клеточная масса (плотное образование из клеток внутри бластоцисты). Из трофэктодермы сформируется в дальнейшем плацента и все зародошевые оболочки. Из внутренней клеточной массы будут формироваться все ткани и органы будущего ребенка. На данном этапе развития эмбрион оценивают по 3 критериям:по размеру полости, качеству трофэктодермы и качеству внутриклеточной массы.

Размер полости оценивают цифрой от 1-ого до 4-х. Внутриклеточную массу и трофэктодерму оценивают буквами от А до С. Первая буква в оценке качества будет относится к внутриклеточной массе, вторая – к качеству трофэктодермы. Если бластоциста успела совершить «хетчинг» (разрыв оболочки, окружающий эмбрион), такой бастоцисте присваивается цифра 5. Если же бластоциста успела полностью выбраться из оболочки после хетчинга, такую бластоцисту обозначат цифрой 6. Размер полости имеет меньшее значение в определении качества эмбриона, чем буквенная классификация. Ввиду того, что эмбрионы имеют индивидуальные особенности, они могут развиваться неравномерно. Любой размер полости определяется как вариант нормы. Буквенные обозначения следует понимать так: наивысшее качество оценивается буквой А, наихудший вариант развития внутриклеточной массы и трофэктодермы обозначается буквой С.

Важно понимать, что критерии оценки эмбрионов носят субъективный характер. Даже эмбрионы, оцененные по классификации как эбмрионы среднего и ниже среднего качества, могут дать полноценную беременность.

Бластоцисты хорошего качества

3АА

4АА

5АА

Под микроскопом эмбриолога. Эмбриологический этап в процедуре ЭКО.

Эмбриологическая работа в ЭКО – самый волнительный этап для будущей мамы. Сама женщина не участвует и даже не видит этот процесс, но эмоционально переживает, понимая, что уже где-то там зарождается жизнь, и в чьих-то руках судьба будущего ребенка. Мы хотим немного приоткрыть дверь в эмбриологическую лабораторию, куда закрыт доступ всем, кроме специалистов и рассказать, как зарождаются эмбрионы, кто за ними следит, и как происходит выбор эмбрионов для переноса. Этот интересный этап — не чудо, а четкий сложный процесс, протекающий под руководством специалистов высшего класса.
Кто такой эмбриолог
Знакомьтесь – эмбриологи. Редкие и уникальные кадры, биологи по образованию. Именно они работают над тем, чтобы «чудо» случилось – оплодотворение и зарождение эмбрионов. Это они оценивают качество эмбрионов и принимают решение: из какого эмбриона получится ваш малыш. Это высококвалифицированные специалисты, которые не только работают день и ночь, но и постоянно учатся, перенимая новые тенденции в науке.
Как развивается эмбрион
В первый день после пункции яйцеклетка превращается в зиготу. Возможно, многие помнят этот термин из школьной биологии. На этом этапе мы видим двойной набор хромосом – 23 хромосомы женщины и 23 хромосомы мужчины. Если образовались два шарика – пронуклеусы – значит, оплодотворение прошло хорошо.
После этого, ночью, происходит первое дробление клетки. Второе, утреннее дробление эмбриологи начинают активно наблюдать. На этот момент они уже видят четырехклеточный эмбрион. На третьи сутки – восьмиклеточный эмбрион. Все эти дни с эмбриона не сводят глаз. Ведь его поведение учитывается при оценке.
На четвертые сутки 10-16 клеток эмбриона сливаются воедино, образовалась морула. И вот, наконец-то, пятый день – бластоциста. Эмбрион, который готов к переносу. Ведь на пятый день он уже имеет сложную структуру, состоящую из 128 клеток. На этой стадии эмбрион обладает наибольшей способностью к имплантации, так как уже преодолел препятствия, возникающие на разных стадиях дробления.
Три или пять дней?
Мы культивируем эмбрионы пять дней. Это очень дорогое удовольствие: гигантская нагрузка на эмбриологическую службу, постоянная смена дорогостоящих сред. Задействовано много инкубаторов. Ведь моделируется маточная труба, она вырабатывает различные вещества, которые эмбриологи заменяют специальными средами.
Если в результате стимуляции у нас получилось много яйцеклеток, то эмбрион будет всегда переноситься на пятые сутки. Эмбриологи дают развиться эмбрионам, чтобы выбрать самого сильного. Ведь если эмбрион дожил до 5 дней в искусственной среде, вероятность того что он приживется в матке возрастает.

В тех случаях, когда было получено не много клеток, и созревает только один эмбрион – может быть принято решение о переносе на третий день. Так специалисты дают возможность эмбриону дозреть в матке, пытаясь всеми силами увеличить шансы на беременность.

Предпочтение отдается все-таки переносу на пятый день, потому что на пятый день остаются самые жизнеспособные эмбрионы. Слабые эмбрионы погибают между третьим и пятым днем.
Пять дней – это целая жизнь для эмбрионов, за этот период они постоянно меняются. На третий день он может казаться качественным, а к пятому дню все может кардинально измениться.
Благодаря системе, которая позволяет культивировать эмбрионы пять дней, в случае, если эмбрионы дожили до этого дня – у нас есть гарантии того, что это жизнеспособные эмбрионы.
Самое интересное. Как происходит отбор
Итак, как вы знаете, каждому эмбриону дают оценку. Существует несколько признанных классификаций эмбрионов. В Клинике Нуриевых используется классификация по Гарднеру. Что это такое? Например, возьмем самый лучший эмбрион. Эмбриологи шутливо называют такой эмбрион «отличник» – 5АА. Первая буква показывает качество внутриклеточной массы (ВКМ) – внутренний слой эмбриона, который дает начало плоду. Чем больше внутренняя масса, тем вероятнее – это А, если мельче – B, совсем мало – С.
Вторая буква – оценка внешнего слоя эмбриона – трофобласта. Цифра постоянно меняется, так как эмбрион растет. Цифру можно не писать, она не существенна при оценке.
Получились разные эмбрионы, всем присвоили разные буквы и цифры. Как же эмбриолог будет выбирать? 5АА – базовая система оценки, но она не дает полной информации для выбора эмбрионов.
«Репутация» эмбрионов
Иногда из двух эмбрионов с разными характеристиками, например, 5АА и 5АB, эмбриолог выбирает для пересадки второй эмбрион, с «неидеальными», казалось бы, показателями. Только на первый взгляд показатели «неидеальны», потому что не только качество двух оболочек определяет жизнеспособность эмбриона. Еще один важный критерий – репутация эмбриона. В нашем примере у эмбриона 5АВ она оказалась лучшей.
Репутация эмбриона складывается из множества факторов, полученных в процессе наблюдения за их «поведением» с 1 по 5 день жизни. Учитывается все: какой эмбрион развивался лучше, какой быстрее дробился, как вел себя на каждом этапе – все это в итоге влияет на судьбу эмбриона.
В любом случае, пациенту могут перенести эмбрионы любого класса. Да, эмбрион с показателями АС слабее, чем АА, но у каждого эмбриона, который дожил до пятого дня, всегда есть шанс на дальнейшую жизнь, и из каждого эмбриона может получиться ребенок. Эти показатели лишь первая видимая, но не единственная его характеристика. Окончательную верную оценку эмбриону может дать только специалист эмбриологической лабораторий. Поэтому делать преждевременные выводы, узнавая показатели своих эмбрионов, ни в коем случае нельзя.
Также надо отметить, что качество эмбриона не имеет прямой связи с шансами и исходами беременности. Каждый случай индивидуален.
Заморозка эмбрионов
В первом стимулированном протоколе мы выбираем самые лучшие эмбрионы и переносим их, – остальные эмбрионы замораживаются. Это позволит Вам получить следующую беременность с меньшими финансовыми затратами и без стимуляции в криопротоколе. Еще несколько лет назад после заморозки и разморозки исходы были хуже, чем в свежих протоколах. Сегодня доказано: свежие и замороженные эмбрионы, имеют абсолютно одинаковые шансы. Наука движется вперед и современные среды для заморозки идеальны, и обеспечивают выживаемость эмбрионов свыше 90 процентов.
В нашей Клинике заморозке подлежат только те эмбрионы, которые смогут ее пережить, и соответственно, дать начало беременности уже после разморозки.
У эмбриологов есть четкая сложная инструкция, по которой происходит отбор эмбрионов для заморозки. На решение влияет множество факторов: качество бластоцисты, репутация эмбриона, какой у женщины по счету протокол, какой диагноз и т.д. Принять правильное решение, о том, какой эмбрион замораживать может только эмбриолог.
Как замораживаются эмбрионы? Только методом витрификации. Витрификация – мгновенный способ заморозки, с добавлением специальных растворов – криопротекторов, которые исключают образование кристаллов льда, повреждающих клетки. Механические повреждения сводятся к нулю. Благодаря этому выживаемость эмбрионов составляет более 90 процентов. В нашей Клинике этот метод начал применятся с самой первой заморозки и используется по сегодняшний день.
Мы рекомендуем

Вы – наш пациент, и мы заботимся о Вас. И мы знаем, как непросто проходить через протокол ЭКО.
Все те пять дней, которые требуются эмбриону для полноценного развития, Вам хочется знать, что с ним происходит. Мы написали эту статью, чтобы объяснить вам суть этого сложного этапа.
В эмбриологической лаборатории нашей Клиники созданы идеальные условия для культивирования и хранения эмбрионов. Доверьтесь своему врачу и эмбриологам, они помогут вам найти оптимальный вариант.
Помните, что над вашим протоколом ЭКО трудится не только врач, а вся команда Клиники Нуриевых, которая каждый день думает над тем, как сделать ваше лечение комфортным и эффективным. Постарайтесь провести эти дни в приятных эмоциях и просто отдохнуть. Тогда, все вместе, мы обязательно добьемся успеха.
Прочитали нашу статью и хотите увидеть эмбриологический этап ЭКО своими глазами? Приглашаем в нашу фотогалерею! Там своими глазами вы сможете увидеть то, что обычно скрыто за семью замками — работу наших эмбриологов!